瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒
Prestained Agarose Gel Electrophoresis Kit
*產(chǎn)品特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì)
本產(chǎn)品是上海神鹿生物科技有限公司開發(fā)的用于核酸電泳的試劑盒，具有以下特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì)：
1. 省事：您不用再四處采購瓊脂糖、核酸染料、電泳液和 loading buffer 等試劑，一個(gè)試劑盒全
部解決。
2. 省時(shí)：為您省去了您親自制膠的繁瑣，為您省出一個(gè)小時(shí)左右的實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
3. 省力：瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠采用特制安全可靠的核酸染料預(yù)染，電泳過程無需電泳液染色或后染色，簡(jiǎn)捷方便，即開即用。
4. 省心：用本產(chǎn)品電泳得到的 DNA 片段進(jìn)行膠回收，不影響后續(xù)的 DNA 連接等反應(yīng)。
5. 兼容：瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠為 TAE 體系，與實(shí)驗(yàn)室常規(guī)自制的 TAE 瓊脂糖膠完全一致，使用完美銜接，您只需要用您之前的TAE 電壓電泳即可。
*貨號(hào)及成分
1. 瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠 10 塊，規(guī)格：8 孔，每孔最大上樣量：25µl，您有六個(gè)固定濃度可選，對(duì)應(yīng)貨號(hào)見下表：
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貨 號(hào)
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10088
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10108
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10128
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10158
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10188
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10208
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濃度
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0.8%
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1.0%
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1.2%
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1.5%
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1.8%
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2.0%
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當(dāng)然，您也可以同您的供貨商溝通定制您需要的其他濃度！
2. 6×DNA Loading Buffer 一支，貨號(hào)：10052，規(guī)格：500µl。
6×DNA Loading Buffer 用于瓊脂糖凝膠電泳前 DNA 樣本的處理，使用時(shí)將 1 倍體積的 6
×DNA Loading Buffer 與 5 倍體積的 DNA 樣品混合均勻后上樣。緩沖液組分經(jīng)過優(yōu)化，其中的染料溶液包括指示劑溴酚藍(lán)和二甲苯青 FF，電泳時(shí)可肉眼監(jiān)控 DNA 的遷移。甘油確保樣本在點(diǎn)樣孔底部聚集；EDTA 結(jié)合二價(jià)金屬離子并抑制金屬離子依賴性核酸酶。在 1%的瓊脂糖凝膠中，溴酚藍(lán)的遷移率與 300bp 的雙鏈線性 DNA 片段大致相同，二甲苯青 FF 的遷移率與 4000bp 的雙鏈線性 DNA 片段大致相同。
3. TAE 電泳液一瓶，貨號(hào)：1060，規(guī)格：60ml/瓶。
TAE 是廣泛使用的核酸電泳緩沖液，主要成分是 Tris-乙酸鹽和 EDTA。DNA 分子在高于等電點(diǎn)的緩沖液中帶負(fù)電，向正極移動(dòng)。TAE 緩沖液常用于基因組 DNA、大分子超螺旋 DNA、擴(kuò)增DNA 片段電泳分離，電泳大于 13kb 的片段時(shí)用TAE 緩沖液將取得更好的分離效果。
*運(yùn)輸及保存
瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒的小黑盒需要 4℃保存和運(yùn)輸，有效期 12 個(gè)月。
6×DNA Loading Buffer 可以短時(shí)間 4℃運(yùn)輸，長期需要-20℃保存，有效期 12 個(gè)月。 TAE 電泳液需要常溫運(yùn)輸和保存，有效期 24 個(gè)月。
*自備試劑
核酸樣品、Marker、去離子水
*使用方法
1. 在低溫條件下 TAE 電泳液會(huì)有沉淀物析出，請(qǐng) 37℃水浴溶解并搖晃均勻后使用，不影響使用效果。用去離子水稀釋 50 倍（1 mL 本產(chǎn)品加 49 mL 去離子水），用作電泳液，倒入電泳槽中，電泳液以沒過膠面 1mm 為宜。
2. 取出一塊獨(dú)立包裝的瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠，撕掉表面的塑料膜，反轉(zhuǎn)包裝，用兩手的食指和中指托住塑料殼邊緣，開口向下沒入電泳液中，然后用兩個(gè)大拇指輕輕按壓塑料殼背面中心部分， 瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠就會(huì)落入電泳液中，此時(shí)的預(yù)制膠帶孔面向上，移動(dòng)膠塊，使孔側(cè)端靠近電泳槽負(fù)極。如樣品孔內(nèi)有氣泡，應(yīng)設(shè)法除去。
3. 在 DNA 樣品中加入 6×DNA loading buffer，混勻后，用移液器將樣品混合液緩慢加入被浸沒的凝膠加樣孔內(nèi)，同時(shí)加入您自己準(zhǔn)備的 Marker。
4. 接通電源，紅色為正極，黑色為負(fù)極，切記 DNA 樣品由負(fù)極往正極泳動(dòng) (靠近加樣孔的一端為負(fù))。
5. 根據(jù)指示劑泳動(dòng)的位置，判斷是否終止電泳。
6. 電泳完畢，關(guān)閉電源，用凝膠成像儀觀察電泳條帶及其位置，與Marker 比較擴(kuò)增產(chǎn)物的大小。
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