<mark id="bahkc"><acronym id="bahkc"></acronym></mark>

          国产精品久久久久久不卡_欧美激情精品久久_99久久免费精品国产72精品九九_精品熟人妻一区二区三区四区不卡_国产麻豆精品一区二区三区

          ?
          生物知識

          MSC Xeno-Free SFM間充質干細胞無血清培養(yǎng)常見問題

          作者:admin 來源:本站 發(fā)布時間: 2020-03-03 21:18  瀏覽次數:
          購買進口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 m.kjhfd.cn

           1.Corning MSC Xeno-Free SFM 的特點是什么?

          Corning MSC Xeno-Free SFM  是一種化學成分限定的無任何動物源性蛋白的培養(yǎng)基,可支持不同來源(脂肪,骨髓,臍帶等)的人間充質干細胞培養(yǎng)和擴增,并可以保持干細胞的分化能力,不需要對培養(yǎng)容器進行預包被即可在普通培養(yǎng)瓶中支持間充質干細胞的長期培養(yǎng),且可以維持其分化能力。
           
          2.使用前培養(yǎng)瓶需要包被嗎?
          不需要,培養(yǎng)基中添加的促進細胞貼壁組分,可以促使細胞在普通組織處理表面(TCT)良好貼壁, 同時推薦使用Corning 獨有的CellBIND 培養(yǎng)表面(T-25 flask, Corning # 3289), 可使間充質干細胞貼壁更好, 產量更高。
           
          3.培養(yǎng)基使用是否要需要加入添加劑或抗生素?
          該培養(yǎng)基為即用型完全培養(yǎng)基,不需要添加任何額外試劑。在細胞培養(yǎng)過程中可以添加抗生素來防止細菌污染,但是細胞治療應用,添加抗生素會有致敏的風險。
           
          4.培養(yǎng)基的運輸和存儲條件是什么?
          培養(yǎng)基中添加了各種生長因子,所以在存儲和運輸過程中需要冷凍(<-20℃)保存, 培養(yǎng)基在使用前于4℃或室溫融化,融化后建議4℃保存并于3-4周內用完;每次使用前室溫平衡30min再使用;盡量避免培養(yǎng)基反復凍融,如用量不大,可將培養(yǎng)基分裝存儲于-20℃,可反復凍融1次使用。
           
          5.建議細胞的接種密度是多少?
          建議細胞的接種密度為5000 cells/cm²,如果是新復蘇細胞或第一次使用該培養(yǎng)基培養(yǎng),建議細胞接種密度為10000 cells/cm².
           
          6.是否可以用來做間充質干細胞的原代分離培養(yǎng)?
          否,該培養(yǎng)基是專為間充質干細胞的擴增培養(yǎng)所設計,可支持不同來源間充質干細胞的長期培養(yǎng), 不能用于原代MSC 分離。
           
          7.MSC 培養(yǎng)過程中如何傳代?
          根據細胞接種密度和生長狀態(tài),當細胞的融合度達到80%左右時,可進行細胞傳代,棄去培養(yǎng)基, 適量PBS(0.2ml/cm2)潤洗后棄去,加入適量商業(yè)化的胰酶替代物(Corning #  25-058-CL)消化, 顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶并吹打,使所有細胞解離表面,加適量PBS 稀釋胰酶替代物,離心1000rpm,5min 收獲細胞。(如果使用胰酶消化, 需要離心盡量去除胰酶,減少殘留)。
           
          8.為什么細胞融合度不可超過90%?
          細胞生長過密,會出現(xiàn)接觸抑制,繼而細胞活性會受到影響,導致后續(xù)傳代細胞生長緩慢或擴增倍數較低;并且產生接觸抑制后MSC 細胞容易分化。
           
          9.為什么Corning CellBIND 表面會提高間充質干細胞的收獲量
          Corning CellBIND 表面利用獨有的表面處理技術,增加了細胞培養(yǎng)表面親水的持久性與細胞吸附的穩(wěn)定性,可以更好的支持貼壁細胞的培養(yǎng),特別針對MSC 細胞,與Corning Xeno-Free SFM  聯(lián)合使用,可有效提高細胞的收獲量30%。
           
          10.為什么不同來源的間充質干細胞培養(yǎng)時會有差異?
          間充質干細胞屬于原代細胞,會受到供體差異,組織來源差異及傳代次數的影響,細胞在培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)較大的差異。 Corning® MSC Xeno-Free SFM可支持脂肪、臍帶和骨髓來源的間充質干細胞生長,細胞形態(tài)與間充質干細胞表面標志物表達正常,并且擴增倍數和穩(wěn)定性整體表現(xiàn)良好。
           
          11.該培養(yǎng)基是否可以培養(yǎng)其他動物來源的間充質干細胞?
          該培養(yǎng)基專為人間充質干細胞培養(yǎng)擴增設計,目前不能應用于除人外其他動物來源的間充質干細。
           
          12.該培養(yǎng)基為沒有酚紅作為指示劑,其換液頻率是什么?
          間充質干細胞培養(yǎng)過程中的換液頻率取決于細胞培養(yǎng)狀態(tài)和細胞接種密度,一般為3-4天進行換液,按照我們培養(yǎng)經驗,接種密度為5000 cells/cm2, 可培養(yǎng)4天換液或傳代,接種密度為10000 cells/cm2, 可培養(yǎng)3天換液或傳代。
           
           
           
           
          Corning® MSC Xeno-Free SFM 間充質干細胞無血清培養(yǎng)基
           

           

           

            Corning® MSC Xeno-Free SFM特點

          成分明確,不包含血清及其他任何人源以外成分

          使用方便,無需額外添加物

          運輸及存儲溫度單一(-20℃)

          無需包被,直接培養(yǎng)

          可支持不同來源間充質干細胞生長,包括:

            脂肪來源間充質干細胞 ADSC

            臍帶來源間充質干細胞  UC-MSC

            骨髓來源間充質干細胞BM-MSC

           

           

           

          產品訂購信息

          貨號               產品名稱                                  體積                   包裝

           

          88-600-CV     Corning 間充質干細胞無血清培養(yǎng)基                           500 毫升                  

           

           

          使用Corning® MSC Xeno-Free SFM培養(yǎng)基進行MSC的擴增

          Corning® MSC Xeno-Free SFM置于4℃冰箱至完全融化。

          注意:不要將Corning® MSC Xeno-Free SFM反復凍融。為了不影響使用效果,4解凍后,建議在一個月內使用完。

           

          將凍存復蘇或原代分離的間充質干細胞利用Corning® MSC Xeno-Free SFM培養(yǎng)基直接接種于細胞培養(yǎng)瓶中(TCT 或者 CellBIND表面處理均可)。

           

          待細胞生長鋪滿(融合度約80-90%),移除培養(yǎng)基。PBS清洗,用0.25%胰蛋白酶消化3-5min培養(yǎng)基終止,300g  x  5  min離心獲得細胞沉淀。新培養(yǎng)基重懸細胞沉淀,5000-10000/cm2接種于新的培養(yǎng)器皿中。培養(yǎng)基用量依據細胞培養(yǎng)器皿底面積,下表可供參考。

          注意:細胞接種密度可依據實驗計劃、不同細胞類型及供體調整。

           

          Vessel

          Surface Area (cm2)

          Medium volume (mL)

          T25 flask

          25

          5

          T75 flask

          75

          15

          T175 flask

          175

          35-50

          CellSTACK

          636 (1 chamber)

          150

          HYPERflask

          1720

          570

          待細胞長滿后,細胞可收獲用于下游實驗或凍存。

           


          康寧相關產品

           

          貨號

          產品名稱

          Qty/Pk

          Qty/Cs

          21-040-CV

          PBS緩沖液

          6

          1

          25-051-CI

          0.05% Trypsin

          6

          6

          430639

          組織培養(yǎng)表面處理T-25 flask

          20

          200

          3289

          CellBIND®表面處理 T-25 flask

          20

          200

          10024

          HYPERflask

          4

          24

          3313

          CellSTACK 5-chamber, TCT

          1

          8

          3311

          CellSTACK 5-chamber, CellBIND

          1

          2

           

           北京畢特博生物技術有限責任公司

          http://m.kjhfd.cn
          400熱線:400-833-9299
          電話:010-82015225
          傳真:010-62015131
          聯(lián)系人:張鈺
          手機:13366202681
          QQ:1050524889

          購買進口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 m.kjhfd.cn

          所有試劑均用于科研 ???? 北京畢特博生物技術有限責任公司 版權所有
          服務熱線:010-82015225/400-833-9299 | 傳真:010-62015131 | E-mail:info@bitebo.com
          京ICP備05028556號-1 ??京公網安備11010802008747??

          亚洲av无码乱码在线观看裸奔_欧美激情精品久久_99久久免费精品国产72精品九九_精品熟人妻一区二区三区四区不卡

          <mark id="bahkc"><acronym id="bahkc"></acronym></mark>