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1.Corning MSC Xeno-Free SFM 的特點是什么? Corning MSC Xeno-Free SFM 是一種化學成分限定的無任何動物源性蛋白的培養(yǎng)基,可支持不同來源(脂肪,骨髓,臍帶等)的人間充質干細胞培養(yǎng)和擴增,并可以保持干細胞的分化能力,不需要對培養(yǎng)容器進行預包被即可在普通培養(yǎng)瓶中支持間充質干細胞的長期培養(yǎng),且可以維持其分化能力。
2.使用前培養(yǎng)瓶需要包被嗎?
不需要,培養(yǎng)基中添加的促進細胞貼壁組分,可以促使細胞在普通組織處理表面(TCT)良好貼壁, 同時推薦使用Corning 獨有的CellBIND 培養(yǎng)表面(T-25 flask, Corning # 3289), 可使間充質干細胞貼壁更好, 產量更高。
3.培養(yǎng)基使用是否要需要加入添加劑或抗生素?
該培養(yǎng)基為即用型完全培養(yǎng)基,不需要添加任何額外試劑。在細胞培養(yǎng)過程中可以添加抗生素來防止細菌污染,但是細胞治療應用,添加抗生素會有致敏的風險。
4.培養(yǎng)基的運輸和存儲條件是什么?
培養(yǎng)基中添加了各種生長因子,所以在存儲和運輸過程中需要冷凍(<-20℃)保存, 培養(yǎng)基在使用前于4℃或室溫融化,融化后建議4℃保存并于3-4周內用完;每次使用前室溫平衡30min再使用;盡量避免培養(yǎng)基反復凍融,如用量不大,可將培養(yǎng)基分裝存儲于-20℃,可反復凍融1次使用。
5.建議細胞的接種密度是多少?
建議細胞的接種密度為5000 cells/cm²,如果是新復蘇細胞或第一次使用該培養(yǎng)基培養(yǎng),建議細胞接種密度為10000 cells/cm².
6.是否可以用來做間充質干細胞的原代分離培養(yǎng)?
否,該培養(yǎng)基是專為間充質干細胞的擴增培養(yǎng)所設計,可支持不同來源間充質干細胞的長期培養(yǎng), 不能用于原代MSC 分離。
7.MSC 培養(yǎng)過程中如何傳代?
根據細胞接種密度和生長狀態(tài),當細胞的融合度達到80%左右時,可進行細胞傳代,棄去培養(yǎng)基, 適量PBS(0.2ml/cm2)潤洗后棄去,加入適量商業(yè)化的胰酶替代物(Corning # 25-058-CL)消化, 顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶并吹打,使所有細胞解離表面,加適量PBS 稀釋胰酶替代物,離心1000rpm,5min 收獲細胞。(如果使用胰酶消化, 需要離心盡量去除胰酶,減少殘留)。
8.為什么細胞融合度不可超過90%?
細胞生長過密,會出現(xiàn)接觸抑制,繼而細胞活性會受到影響,導致后續(xù)傳代細胞生長緩慢或擴增倍數較低;并且產生接觸抑制后MSC 細胞容易分化。
9.為什么Corning CellBIND 表面會提高間充質干細胞的收獲量
Corning CellBIND 表面利用獨有的表面處理技術,增加了細胞培養(yǎng)表面親水的持久性與細胞吸附的穩(wěn)定性,可以更好的支持貼壁細胞的培養(yǎng),特別針對MSC 細胞,與Corning Xeno-Free SFM 聯(lián)合使用,可有效提高細胞的收獲量30%。
10.為什么不同來源的間充質干細胞培養(yǎng)時會有差異?
間充質干細胞屬于原代細胞,會受到供體差異,組織來源差異及傳代次數的影響,細胞在培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)較大的差異。 Corning® MSC Xeno-Free SFM可支持脂肪、臍帶和骨髓來源的間充質干細胞生長,細胞形態(tài)與間充質干細胞表面標志物表達正常,并且擴增倍數和穩(wěn)定性整體表現(xiàn)良好。
11.該培養(yǎng)基是否可以培養(yǎng)其他動物來源的間充質干細胞?
該培養(yǎng)基專為人間充質干細胞培養(yǎng)擴增設計,目前不能應用于除人外其他動物來源的間充質干細。
12.該培養(yǎng)基為沒有酚紅作為指示劑,其換液頻率是什么?
間充質干細胞培養(yǎng)過程中的換液頻率取決于細胞培養(yǎng)狀態(tài)和細胞接種密度,一般為3-4天進行換液,按照我們培養(yǎng)經驗,接種密度為5000 cells/cm2, 可培養(yǎng)4天換液或傳代,接種密度為10000 cells/cm2, 可培養(yǎng)3天換液或傳代。
Corning® MSC Xeno-Free SFM 間充質干細胞無血清培養(yǎng)基
Corning® MSC Xeno-Free SFM特點 成分明確,不包含血清及其他任何人源以外成分 使用方便,無需額外添加物 運輸及存儲溫度單一(-20℃) 無需包被,直接培養(yǎng) 可支持不同來源間充質干細胞生長,包括: • 脂肪來源間充質干細胞 ADSC • 臍帶來源間充質干細胞 UC-MSC • 骨髓來源間充質干細胞BM-MSC
產品訂購信息 貨號 產品名稱 體積 包裝
|
Vessel |
Surface Area (cm2) |
Medium volume (mL) |
T25 flask |
25 |
5 |
T75 flask |
75 |
15 |
T175 flask |
175 |
35-50 |
CellSTACK |
636 (1 chamber) |
150 |
HYPERflask |
1720 |
570 |
待細胞長滿后,細胞可收獲用于下游實驗或凍存。
康寧相關產品 |
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貨號 |
產品名稱 |
Qty/Pk |
Qty/Cs |
21-040-CV |
PBS緩沖液 |
6 |
1 |
25-051-CI |
0.05% Trypsin |
6 |
6 |
430639 |
組織培養(yǎng)表面處理T-25 flask |
20 |
200 |
3289 |
CellBIND®表面處理 T-25 flask |
20 |
200 |
10024 |
HYPERflask |
4 |
24 |
3313 |
CellSTACK 5-chamber, TCT |
1 |
8 |
3311 |
CellSTACK 5-chamber, CellBIND |
1 |
2 |
http://m.kjhfd.cn
400熱線:400-833-9299
電話:010-82015225
傳真:010-62015131
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QQ:1050524889
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m.kjhfd.cn |
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