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免責(zé)聲明:本文內(nèi)容來(lái)自互聯(lián)網(wǎng),如有不慎侵害的您的權(quán)益,請(qǐng)告知我們,將盡快刪除。 這個(gè)”血清熱滅活”的場(chǎng)景很熟悉嗎? 你有可能在浪費(fèi)時(shí)間!
細(xì)胞生物學(xué)家比較了正常熱滅活胎牛血清對(duì)各種細(xì)胞株的生長(zhǎng)能力影響,發(fā)現(xiàn)11株細(xì)胞中,熱滅活對(duì)6 株細(xì)胞有負(fù)面影響(紅)、3株無(wú)影響(綠)、2株有微弱正面改善(黃)(下圖1)。
▲圖1:使用未滅活或滅活血清的細(xì)胞生長(zhǎng)狀況。
所以,在正常操作下,熱滅活通常對(duì)“細(xì)胞生長(zhǎng)”沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用,反而會(huì)破壞血清內(nèi)生長(zhǎng)因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),降低細(xì)胞增殖速度。 血清熱滅活的缺點(diǎn)
萬(wàn)一小艾設(shè)錯(cuò)水浴溫度或忘記按計(jì)時(shí)器,都會(huì)導(dǎo)致過(guò)高的加熱溫度(下圖2)或過(guò)長(zhǎng)的加熱時(shí)間(下圖3),進(jìn)而大大降低血清的功能,影響細(xì)胞生長(zhǎng)的表現(xiàn)。 ▲圖2:過(guò)高的加熱溫度降低大多細(xì)胞株生長(zhǎng)速度(僅一株未受明顯影響)。 ▲圖3:過(guò)長(zhǎng)的加熱時(shí)間降低大多細(xì)胞株生長(zhǎng)速度(僅一株未受明顯影響)。 且滅活加熱過(guò)程會(huì)增加血清的沉淀狀況,而沉淀又常常被認(rèn)為是微生物的污染,進(jìn)而耗費(fèi)大量時(shí)間及精力驗(yàn)證是否污染,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)一再拖延。 我的細(xì)胞一定要用滅活血清怎么辦?
在滅活過(guò)程中,除了需要嚴(yán)格監(jiān)測(cè)加熱溫度及認(rèn)真計(jì)算時(shí)間,還有幾個(gè)小技巧可以注意噢!
滅活時(shí),水浴槽水面與血清液面等高。 ▲圖4:300ml刻度水位需要60分鐘加溫;500ml刻度水位僅需40分鐘加溫。 至于血清瓶漂浮的問(wèn)題,套上燒瓶用鉛環(huán)(下圖5)就解決啦! 滅活后,使用冷水浴降溫! 養(yǎng)細(xì)胞的各位 自己的實(shí)驗(yàn)步驟了呢? 本文重點(diǎn) 現(xiàn)代血清加工技術(shù)進(jìn)步,熱滅活已成為非必要步驟。 熱滅活對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)沒(méi)有明顯促進(jìn)作用,反而會(huì)破壞血清、增加沉淀狀況。 除非文獻(xiàn)指出該細(xì)胞必須使用滅活血清,一般細(xì)胞培養(yǎng)可省略血清熱滅活步驟。 如果必須使用滅活血清,加熱時(shí)水浴槽水面高度盡量與血清液面等高;滅活后使用冷水浴取代冰箱降溫,能最大程度減少對(duì)血清的破壞。直接選擇購(gòu)買已滅活的血清產(chǎn)品,也是個(gè)好選擇噢!
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