<mark id="bahkc"><acronym id="bahkc"></acronym></mark>

          国产精品久久久久久不卡_欧美激情精品久久_99久久免费精品国产72精品九九_精品熟人妻一区二区三区四区不卡_国产麻豆精品一区二区三区

          ?
          生物知識(shí)

          人甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

          作者:admin 來(lái)源:本站 發(fā)布時(shí)間: 2011-02-21 20:36  瀏覽次數(shù):
          購(gòu)買進(jìn)口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 m.kjhfd.cn

          人(Human)甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
           

          本試劑僅供研究使用  

          試驗(yàn)原理

                  AFP-L3試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA.已知AFP-L3濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將AFP-L3和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中AFP-L3的濃度呈比例關(guān)系。

          自備材料

          1.  蒸餾水。

          2.  加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul200ul、500ul1000ul。

          3.  振蕩器及磁力攪拌器等。

          4.

          樣品收集、處理及保存方法

          1、 血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原

          和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅

          細(xì)胞迅速小心地分離。

          2、  血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

          3、  細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

          4、  組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

           5、  保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

          操作注意事項(xiàng)

          ●   試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

          ●   實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

          ●   不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

          ●   使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。

          ●   使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

          ●   底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

          ●   加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

          ●   按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

          安全性

          1.   避免直接接觸終止液和底物AB,一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。

          2.   實(shí)難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

          3.   不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          試劑的準(zhǔn)備

          1.   標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:

          2.   洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

          試劑盒性能

          1.   靈敏度:最小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990

          2.   特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

          3.   重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

          操作步驟

          1.   使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

          2.   根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

          3.   加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。

          4.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

          5.   每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

          6.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

          7.   每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。

          8.   取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

          9.   在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

          結(jié) 果 判 斷 與 分 析

          1、  儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD

          2、  以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的AFP-L3標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的AFP-L3含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

          3、  檢測(cè)值范圍: 0-50ng/ml

          4、  敏感度:0.1ng/ml

          購(gòu)買進(jìn)口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 m.kjhfd.cn

          所有試劑均用于科研 ???? 北京畢特博生物技術(shù)有限責(zé)任公司 版權(quán)所有
          服務(wù)熱線:010-82015225/400-833-9299 | 傳真:010-62015131 | E-mail:info@bitebo.com
          京ICP備05028556號(hào)-1 ??京公網(wǎng)安備11010802008747??

          亚洲av无码乱码在线观看裸奔_欧美激情精品久久_99久久免费精品国产72精品九九_精品熟人妻一区二区三区四区不卡

          <mark id="bahkc"><acronym id="bahkc"></acronym></mark>