牛精液冷凍保存是將精液進(jìn)行特殊處理,保存在超低溫下,以達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的。通常采用液氮(-196℃)和干冰(-79℃)保存。其最大優(yōu)點(diǎn)是可長(zhǎng)期保存,使用不受時(shí)間、地域以及種用雄性動(dòng)物壽命的限制。可充分提高公牛的利用率?,F(xiàn)將冷凍精液的保存和怎樣進(jìn)行解凍及給母牛輸精的有關(guān)技術(shù)操作介紹如下,供參考。
稀釋液的配方
12%的蔗糖液75毫升、甘油5毫升、卵黃液20毫升。
稀釋方法
將經(jīng)過(guò)檢查合格的精液按1∶2倍~5倍稀釋液進(jìn)行稀釋,其稀釋原則應(yīng)保證每個(gè)顆粒精液中所含精子數(shù)不少于3000萬(wàn)個(gè)~4000萬(wàn)個(gè),解凍后呈直線前進(jìn)運(yùn)行的精子不少于1500萬(wàn)個(gè)。
冷凍
在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng),距液氮面2厘米左右。將平衡后的精液用滴管按一定量滴于銅紗網(wǎng),滴完最后一滴停3分鐘~5分鐘,當(dāng)精液顆粒顏色變白時(shí),立即浸入液氮,并將全部顆粒取下,收集于儲(chǔ)精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi),并做好標(biāo)記,然后立即移入液氮罐中儲(chǔ)存。
解凍
將預(yù)先配制好的9%檸檬酸的溶液1毫升,放入干凈的小試管中,再置于40℃左右的溫水杯中,迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動(dòng)至化凍時(shí),從水杯中取出試管,接著檢查精液活力,即為合格品。
重視保精、快速解凍與鏡檢
1.根據(jù)液氮罐的性能要求,定期添加液氮,罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮外面。
2.取精時(shí),盡可能用長(zhǎng)鑷子,切勿將提筒或紗布袋提到臨界線以上處(罐頂10厘米左右)。
3.從液氮中取出細(xì)管凍精時(shí),要輕輕甩一兩下,將塑料細(xì)管的棉塞端放入35℃~40℃的溫水中,把封口端留在水外3厘米外,待管內(nèi)精液融化一半時(shí),立即取出備用。
4.解凍后的精液鏡檢時(shí),精子的活力不低于標(biāo)準(zhǔn)方可用于輸精,才能確保正常受精。
5.解凍后的精液應(yīng)立即輸配,不宜停放時(shí)間過(guò)長(zhǎng),應(yīng)做到現(xiàn)解凍,現(xiàn)輸精。
適時(shí)輸精
母牛正常排卵是在發(fā)情結(jié)束后6小時(shí)~12小時(shí),精子在母牛生殖道的存活時(shí)間為12小時(shí)~20小時(shí),且還需要4小時(shí)~6小時(shí)的獲能過(guò)程,才能與卵子結(jié)合受精。精子15分鐘就會(huì)到達(dá)輸卵管受精部位,因此,讓精子早于卵子到達(dá)輸卵管受精部位是提高受胎率的先決條件。
1.適宜的輸精時(shí)間:在母牛的發(fā)情后期。此時(shí)母牛表現(xiàn)精神平穩(wěn),外陰部腫脹消失,陰道不再流出透明液體。直腸檢查卵泡脹大,表面緊張,有一觸即破之感,此時(shí)為最佳輸精時(shí)間。
2.適宜的輸精部位:在子宮頸內(nèi)口1厘米處即子宮體基部,過(guò)淺易導(dǎo)致精液外流,過(guò)深易損傷子宮內(nèi)黏膜。
3.適宜的輸精方法:直腸把握子宮頸輸精法。將母牛保定,左手插入母牛直腸輕輕握住子宮頸后端,右手將輸精器自陰門向斜上方緩慢插入5厘米~10厘米(以避開(kāi)尿道口)再改為平插送到子宮頸口,緩慢越過(guò)子宮頸管中的皺壁,到達(dá)子宮頸基部,慢慢注入精液后,緩緩抽出輸精器。
4.適宜的輸精次數(shù):以1次~2次為宜。可在發(fā)情母牛發(fā)情高潮后,黃牛在發(fā)情高潮后6小時(shí)~12小時(shí),水牛在發(fā)情高潮后18小時(shí)~20小時(shí)進(jìn)行第一次輸精,前后間隔8小時(shí)~12小時(shí)再進(jìn)行第二次輸精。
程序降溫儀 網(wǎng)址鏈接 http://m.kjhfd.cn/a/gb2312/yiqi/CryoLogic/2013/0904/5082.html
胚胎冷凍儀 網(wǎng)址鏈接 http://m.kjhfd.cn/a/gb2312/yiqi/CryoLogic/2010/0428/3073.html |