鹽酸培他啶氯化鈉注射液收載于《山東省藥品標(biāo)準(zhǔn)》(1986年版)下篇第486頁(yè)，規(guī)格500ml:鹽酸倍他啶0.02g+氯化鈉4.5g,家兔法熱原檢查劑量為10ml/kg。由于細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法具有簡(jiǎn)便、快捷、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，越來(lái)越多的藥品品種原來(lái)規(guī)定的熱原檢查項(xiàng)，將逐漸被細(xì)菌內(nèi)毒素檢查項(xiàng)所取代。
1 實(shí)驗(yàn)材料
鱟試劑(批號(hào)990106,靈敏度0.5Eu/ml,廈門(mén)鱟試劑廠；批號(hào)980305,靈敏度0.25Eu/ml,湛江海洋生物制品廠)。鱟試劑溶解水(批號(hào)980510,規(guī)格2ml/支，廈門(mén)鱟試劑廠；批號(hào)970425,規(guī)格2ml/支，湛江海洋生物制品廠)。細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào)970201,效價(jià)10Eu/支，廈門(mén)鱟試劑廠)。DH-3電子旋渦混合器(天津光學(xué)儀器廠)。1ml注射器、針頭、試管、刻度吸管若干，均經(jīng)250℃干烤1h。鹽酸培他啶氯化鈉注射液(批號(hào)990507,990508,990510和990511,本院滅菌制劑室)。
2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果
2.1 鱟試劑靈敏度復(fù)核 用鱟試劑溶解水將細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品溶解，在旋渦混合器上混勻15min,然后等比稀釋成系列濃度溶液，即1.0,0.5,0.25,0.125和0.0625Eu/ml,每稀釋一步，均在旋渦混合器上混合30s，與鱟試劑進(jìn)行凝膠化反應(yīng)，結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 鱟試劑靈敏度復(fù)核
鱟試劑靈敏
度/Eu．ml-1細(xì)菌內(nèi)毒素濃度/Eu．ml-1陰性
對(duì)照
1.00.50.250.1250.0625
0.5++++------------ --
0.25 ++++--------------
2.2 細(xì)菌內(nèi)毒素限值(L)和最大有效稀釋倍數(shù)(D)的計(jì)算［1］ 根據(jù)靜脈用藥細(xì)菌內(nèi)毒素致熱閥K為5.0Eu/kg,鹽酸培他啶氯化鈉注射液的致熱原檢查劑量M為10ml/kg,則L=K/M=5Eu/kg/10ml/kg=0.5Eu/ml。最大有效稀釋倍數(shù)(D)，靈敏度λ=0.5Eu/ml的鱟試劑，D=L/λ=0.5/0.5=1;對(duì)靈敏度λ=0.25Eu/ml的鱟試劑,D=L/λ=0.5/0.25=2。
2.3 干擾試驗(yàn)［2］ 將鹽酸培他啶氯化鈉注射液原液和2倍稀釋液分別溶解細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品，在旋渦混合器上混勻15min,然后等比稀釋成系列濃度溶液，每稀釋一步均在旋渦混合器上混合30s，與鱟試劑進(jìn)行凝膠化反應(yīng)，結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 鹽酸培他啶氯化鈉注射液干擾試驗(yàn)
供試品批號(hào)鱟試劑靈敏度
/Eu．ml-1細(xì)菌內(nèi)毒素濃度/Eu．ml-1供試品陰
性對(duì)照陰性對(duì)照
1.00.50.250.1250.0625
990507(原液)0.5++++++++-------- ----
990508(原液)0.5++++++++-------- ----
990510(2倍稀釋)0.25 ++++++++------------
990511(2倍稀釋)0.25 ++++++++------------
2.4 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法和家兔法檢查測(cè)鹽酸培他啶氯化鈉注射液結(jié)果對(duì)比，見(jiàn)表3。
表3 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法與家兔法結(jié)果對(duì)比
供試品批號(hào)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查結(jié)果家兔法檢查結(jié)果
990507--
990508--
990510--
990511--
3 討 論3.1 我們采用不同批號(hào)的鹽酸培他啶氯化鈉注射液，對(duì)不同廠家的鱟試劑進(jìn)行干擾試驗(yàn)，結(jié)果顯示，均無(wú)干擾作用，且細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法與家兔致熱原檢查結(jié)果一致，臨床無(wú)熱原反應(yīng)，因此，作為醫(yī)院制劑的鹽酸培他啶氯化鈉注射液，建立細(xì)菌內(nèi)毒素檢查項(xiàng)代替原來(lái)的致熱原檢查是可行的。
3.2 鹽酸培他啶氯化鈉注射液的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查項(xiàng)為：取本品，依法檢查［2］，每1ml中含內(nèi)毒素量不得過(guò)0.5Eu/ml?？捎渺`敏度為0.5Eu/ml的鱟試劑直接進(jìn)行檢測(cè)；或用靈敏度為0.25Eu/ml的鱟試劑檢測(cè)本品的2倍稀釋液。
參考文獻(xiàn)
1，黃清泉，夏振民.藥品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì).中國(guó)藥學(xué)雜志，1997，32(2)∶72.
2，中國(guó)藥典.二部.1995∶附錄ⅪE 76.
收稿日期：1999-12-13
中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué) 2000年第6期第17卷 藥物分析與檢驗(yàn)
作者：范文濤 錢(qián)丙坤 董華
單位：山東冠縣人民醫(yī)院 冠縣 252500
本文來(lái)自:大眾醫(yī)藥網(wǎng)
http://www.51qe.cn/pic/30/15/15/18/14/2251.htm
|
