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          生物知識(shí)

          常用培養(yǎng)基及抗生素配置

          作者:admin 來(lái)源:網(wǎng)絡(luò) 發(fā)布時(shí)間: 2010-05-30 21:53  瀏覽次數(shù):
          購(gòu)買進(jìn)口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 m.kjhfd.cn
          LB培養(yǎng)基
          將下列組分溶解在0.9L水中:

          蛋白胨
          10g
          酵母提取物
          5g
          氯化鈉
          10g

          如果需要用1N NaOH(~1ml)調(diào)整pH至7.0,再補(bǔ)足水至1L。注:瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。
          SOB培養(yǎng)基
          將下列組分溶解在0.9L水中:

          蛋白胨
          20g
          酵母提取物
          5g
          氯化鈉
          0.5g
          1 mol/L 氯化鉀
          2.5ml


          用水補(bǔ)足體積到1L。分成100ml的小份,高壓滅菌。培養(yǎng)基冷卻到室溫后,再在每100ml的小份中加1ml滅過(guò)菌的1mol/L氯化鎂。
          SOC培養(yǎng)基
          成分、方法同SOB培養(yǎng)基的配制,只是在培養(yǎng)基冷卻到室溫后,除了在每100ml的小份中加1ml滅過(guò)菌的1mol/L氯化鎂外,再加2ml滅菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足夠水中,再用水補(bǔ)足到100ml,用0.22um的濾膜過(guò)濾除菌)。
          TB培養(yǎng)基
          將下列組分溶解在0.9L水中:

          蛋白胨
          12g
          酵母提取物
          24g
          甘油
          4ml

          各組分溶解后高壓滅菌。冷卻到60℃,再加100ml滅菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使終體積為100ml。高壓滅菌或用0.22um的濾膜過(guò)濾除菌)。
          2×YT培養(yǎng)基
          將下列組分溶解在0.9L水中:

          蛋白胨
          16g
          酵母提取物
          10g
          氯化鈉
          4ml

          如果需要用1N NaOH(~1ml)調(diào)整pH至7.0,再補(bǔ)足水至1L。注:瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。
          YPD培養(yǎng)基
          將下列組分溶解在0.9L水中:

          蛋白胨
          20g
          酵母提取物
          10g
          葡萄糖
          20g

          用水補(bǔ)足體積為1L后,高壓滅菌。建議在高壓滅菌之前,對(duì)色氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型每升培養(yǎng)基添加1.6g色氨酸,因?yàn)閅PD培養(yǎng)基是色氨酸限制型培養(yǎng)基。為了配制平板,需要在高壓滅菌前加入20g瓊脂粉。


          氨芐青霉素(ampicillin)(100mg/ml)
          溶解1g氨芐青霉素鈉鹽于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以25ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
          羧芐青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)
          溶解0.5g羧芐青霉素二鈉鹽于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以25ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
          甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)
          溶解1g甲氧西林鈉于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以37.5ug/ml終濃度與100ug/ml氨芐青霉素一起添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
          卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)
          溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
          氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)
          溶解250mg氯霉素足量的無(wú)水乙醇中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以12.5ug/ml~25ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
          鏈霉素(streptomycin)(50mg/ml)
          溶解0.5g鏈霉素硫酸鹽于足量的無(wú)水乙醇中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
          萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)
          溶解50mg萘啶酮酸鈉鹽于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以15ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
          四環(huán)素(tetracyyline)(10mg/ml)
          溶解100mg四環(huán)素鹽酸鹽于足量的水中,或者將無(wú)堿的四環(huán)素溶于無(wú)水乙醇,定容至10ml。分裝成小份用鋁箔包裹裝液管以免溶液見(jiàn)光,于-20℃貯存。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

          購(gòu)買進(jìn)口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 m.kjhfd.cn

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