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          生物知識

          細(xì) 胞 凍 存 方 法

          作者: 來源: 發(fā)布時間: 2009-12-04 11:19  瀏覽次數(shù):
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          凍存方法
          1.細(xì)胞:選對數(shù)生長期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時前換液一次。
          2.計數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。
          3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。
          4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。
          5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,以便日后查找。

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