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很多細(xì)胞治療領(lǐng)域的小伙伴提起康寧KBM581培養(yǎng)基并不陌生。在CIK培養(yǎng)過程中,581以高細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)、突出的細(xì)胞表型和出色的殺傷活力在眾多無(wú)血清培養(yǎng)基中脫穎而出。甚至在NK的培養(yǎng)過程中,581也表現(xiàn)優(yōu)異,不僅可以促進(jìn)細(xì)胞因子和抗體活化的NK細(xì)胞高效擴(kuò)增,對(duì)于飼養(yǎng)層細(xì)胞支持的NK細(xì)胞培養(yǎng)也效果顯著。小編今天要跟大家分享的是,581還能支持T細(xì)胞,尤其是如今在細(xì)胞治療領(lǐng)域大熱的CAR-T細(xì)胞培養(yǎng),即使在完全無(wú)血清條件下,足夠的CAR-T細(xì)胞數(shù)量可以滿足,其表型也能支持目前臨床試驗(yàn)的需求。
以下的數(shù)據(jù)來源于國(guó)內(nèi)知名CAR-T細(xì)胞治療企業(yè)的臨床試驗(yàn)。
研究人員首先對(duì)比了包括KBM581在內(nèi)的不同品牌的5種無(wú)血清培養(yǎng)基在化療病人血液樣本制備CAR-T細(xì)胞中的效果。B-ALL病人在采血前不久接受了化療,分離到PBMC后,用T細(xì)胞分選試劑盒進(jìn)行T細(xì)胞分選,然后用CD3/CD28磁珠活化,同時(shí)加入IL-2進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng);培養(yǎng)第3天,用連接有CD19-CAR基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞,繼續(xù)培養(yǎng)到第14天。與其它商品化的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基相比,581和另一品牌產(chǎn)品Competitor1(Competitor1和Competitor2都被認(rèn)為是最經(jīng)典的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基)獲得了最高的擴(kuò)增效率(8倍,Figure1a)。細(xì)胞表型檢測(cè)結(jié)果顯示581和Competitor1的T細(xì)胞純度、CTL比例都符合該實(shí)驗(yàn)室要求。CD8+的CTL比例都超過80%,提示較高的殺傷活性。
Figure1 不同品牌培養(yǎng)基培養(yǎng)CAR-T細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)和細(xì)胞表型比較
隨后研究人員比較了581與Competitor1在普通未接受放、化療B-ALL病人樣本中,CAR-T細(xì)胞的擴(kuò)增情況。用同樣的分離、刺激和培養(yǎng)方法擴(kuò)增11天,581體系中CAR-T細(xì)胞擴(kuò)增42.8倍,高于Competitor1的40.5倍,生長(zhǎng)曲線顯示581具有推遲的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期和更高的擴(kuò)增潛能(Figure2,由于回輸?shù)男枰?,?xì)胞未繼續(xù)擴(kuò)增)。在其他B-ALL病人和健康人樣本中,研究人員也獲得了相似的結(jié)果。
figure 2
另一個(gè)國(guó)內(nèi)著名CAR-T細(xì)胞研發(fā)企業(yè)對(duì)581和Competitor2 的對(duì)比實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),581與Competitor2培養(yǎng)的CAR-T細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)、細(xì)胞活率及表型(CD3/CD4/CD8亞群比例,Tn/Tcm/Tem亞群比例,PD-1+細(xì)胞比例等)方面沒有顯著差異,二者都可以支持T細(xì)胞尤其是CAR-T細(xì)胞的高效擴(kuò)增。
綜上,581作為一種營(yíng)養(yǎng)豐富的無(wú)血清培養(yǎng)基,不僅適合CIK、NK細(xì)胞的培養(yǎng),也適用于T細(xì)胞,尤其是CAR-T細(xì)胞的擴(kuò)增,是目前細(xì)胞治療臨床試驗(yàn)和研究的最優(yōu)選擇。
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